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點擊次數:13496 發布時間:2012/11/22 13:31:45
進口細胞因子廠家直銷
細胞因子溶解方法
細胞因子中不含載體蛋白(Carrier Protein)或其他添加劑(如BSA、HAS或蔗糖等),并且通常以*少量的鹽來進行凍干處理,因此微量的細胞因子在凍干過程中會沉積于管內,形成很薄或不可見的蛋白層。所以我們建議在收到產品后,務必在開蓋前先離心,使粘在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底(此時能否見到白色沉淀均屬正常現象)。
1.離心:高速離心 (10, 000 rpm) 20-30 秒,或低速離心 (2, 000 rpm) 5 分鐘。
2.溶解(Reconstitution):用去離子水或其它緩沖液(根據說明書要求進行選擇)溶解至說明書要求的濃度 (一般為 0.1-1.0 mg/mL,如10ug的產品,需用10uL-100uL的去離子水或緩沖液溶解)。溶解時不可振蕩,避免因化學鍵的斷裂造成蛋白失活,可加入適當的溶劑輕搖并靜置一段時間,待細胞因子完全溶解后使用。
溶劑的選擇:
1)要求用去離子水溶解的產品,務必不可用鹽溶液,避免過高的鹽濃度造成蛋白不可逆的析出;
2) 要求用鹽溶液溶解的產品,請依照說明書上的濃度,同樣也是為了避免過高的鹽濃度。
3.分裝和貯存(Aliquot and Storage):蛋白溶解后可根據自己的實驗需要進一步稀釋成工作液,稀釋可用RPMI 1640、DMEM或PBS等溶液,其中含有5-10%的FCS (小牛或胎牛血清)或0.5 %的BSA(牛血清白蛋白)來穩定蛋白。工作液在4℃可保存1周,如需長期保存,則需分裝凍存于-20℃ (注意:不可凍存于-80℃)。分裝時每管中工作液的體積是一次實驗的用量,以實現每次實驗用完一只工作液,避免反復凍融引起蛋白活性的降低。
上海恒遠生物科技有限公司始終致力于為生命科學研究開發重組蛋白及相關產品,如今已成為能提供多種高質量細胞因子和重組蛋白,相應的單克隆、多克隆和生物素標記抗體,以及ELISA試劑盒的世界領導者。
上海恒遠產品涵蓋免疫調節蛋白、白介素、集落刺激因子、生長因子、化學趨化因子、干擾素、脂聯素、成纖維生長因子、轉化生長因子、腫瘤壞死因子、神經營養素和防御素等諸多生命科學研究領域中重要的生物活性分子。 為跟蹤當今科研發展、滿足日益增長的需求,上海恒遠研制出無動物成分的重組蛋白 。這些蛋白是利用專有的無動物成分生產設施,在嚴格的無動物成分條件下生產出來,因此痕量的動物源性污染引發潛在問題的可能性被降至,從而完全達到臨床前研究和細胞治療用標準。此外,上海恒遠*新還開發出無動物成分的培養基添加物試劑盒 。這些試劑盒經改良設計,其中的無血清組分對多種哺乳動物細胞的生長有更好的維持能力。
原創作者:上海恒遠生物科技有限公司