在收集標本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。新鮮標本應盡早檢測,對收集后當天就進行檢測的標本,應及時儲存在4℃備用。如因特殊原因需要定期、多次收集標本,請取材后,將標本及時分裝后放在-20℃或以下條件下保存。由于蛋白樣品多不穩定,極易降解,應避免反復凍融,以減少對實驗的影響。1.液體類標本
液體類標本包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(pH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2.組織標本:
采集標本后,稱取組織凈重,用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后要保存在2-8℃的溫度,加入一定量的PBS(pH7.2-7.4),用手工或電動勻漿器將標本充分勻漿。4℃離心(10000-15000轉/分)10-20分鐘。收集上清,留取適量檢測,其余冷凍保存備用。
備注:如果樣本中的待檢物需要提純,請客戶自行處理。
原創作者:上海恒遠生物科技有限公司