血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。胎牛血清是血清中的一種,是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清。胎牛血清是品質的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的
抗體、補體等對細胞有害的成分*少。
胎牛血清的主要作用
1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。
2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。
3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。
4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
胎牛血清的選擇
1.顏色
根據血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現出黃色或紅色,我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高度對血清并無直接影響,這個指標的意義在于能體現出采血過程中嚴謹規范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
進口胎牛血清或多或少總有點溶血,因為真正的胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂。
總的來說,國產的血清總呈現出蠟黃,進口的血清質量的呈現出淡黃、微紅色。當然熱滅活血清或保存不當的血清,由于紅蛋白的破壞氧化,會呈現出暗紅,甚至咖啡色。
2.沉淀
很多血清客戶,會發現
進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質量問題,這是沒有根據的。
血清中的沉淀是由纖維蛋白凝聚產生,對血清質量沒有任何影響,沉淀的產生原因很多,和廠家的加工生產方式密切相關。
國產的血清,大多來自北方,由于價格低廉,保存環境都不好,從采血、冷凍、運輸到生產經過多次凍融,就會析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,很少有沉淀產生。
進口的胎牛血清過濾分裝前很少會反復凍融,生產后的成品也是清澈的,但隨著時間的推移,血清中大量纖維蛋白會析出形成沉淀,當然,進口的新生牛血清,一般牛年齡在2周左右,血清中的各種大量纖維蛋白含量明顯偏高,生產后血清可能會渾濁,甚至有大量沉淀。
當然,購買回來的血清都是冷凍狀態,使用時需要融化,融化過程在溫度較低的狀態下慢慢融化,否則沉淀相對較多,雖然沉淀并不直接影響血清的質量,但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。
3.澄清度
進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質含量低,標簽為稀薄、清淡,而國產血清,因為絕大多數是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,對于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進行對比,可容易分辨。